TAE yang terdiri dari campuran Tris base Acetic acid dan EDTA bekerja sebagai buffer selama elektroforesis gel yang menjaga PH medium agar asam nukleat led mengalir melalui gel dengan lancar. Selain itu, ia menyediakan ion yang membawa arus dan menonaktifkan DNase karena adanya EDTA.
Di sini, buffer mana yang digunakan dalam elektroforesis gel agarosa?
Tris-asetat
Kedua, mengapa agarosa digunakan dalam elektroforesis gel? Elektroforesis gel agarosa memisahkan fragmen DNA menurut ukurannya. Arus listrik digunakan untuk memindahkan molekul DNA melintasi gel agarosa , yang merupakan matriks polisakarida yang berfungsi sebagai semacam saringan. Matriks membantu “menangkap” molekul saat mereka diangkut oleh arus listrik.
Oleh karena itu, mengapa buffer digunakan dalam elektroforesis gel sebagai pengganti air?
Buffer diperlukan untuk menjaga pH larutan DNA mendekati level netral karena jika dapat menjadi asam melalui elektrolisis . Arus listrik yang disebabkan oleh elektroda dapat menyebabkan molekul air terdisosiasi dan melepaskan ion H+.
Berapa pH buffer TBE?
penyangga TBE . Solusi kerja 0,5X adalah 45 mM Tris-borat/1 mM EDTA. TBE biasanya dibuat dan disimpan sebagai larutan stok 5X atau 10X. PH buffer stok pekat harus ~8,3.